你是否遇到過檢測實驗室從某個時間開始，熒光PCR檢測結果經常出現陽性，而豬群長時間觀測卻沒有任何問題？

    你可能遇到了實驗室核酸污染問題。

    實時熒光PCR技術目前被廣泛運用于疾病的實驗室診斷、篩查等多個方面。長期的PCR實驗，造成目標DNA片段大量累積、合成，不可避免地給實驗室環境帶來核酸污染，由于核酸不會自動降解，因此會在實驗室環境內不斷積聚。

    由于實時熒光PCR技術靈敏度很高，即使少量的目標核酸片段污染，也會被檢測出來，從而出現陽性結果，造成實驗室檢測與臨床一線情況不符。

    PCR檢測實驗室在運行中，需要預防和消除以往實驗殘留的陽性核酸。

    實驗室紫外照射對祛除核酸污染并不理想，不僅對照射距離和時間有要求，也僅對500bp以上長片段有效，對短片段效果不大，而實時熒光PCR的擴增片段一般在200bp以內。

    實驗室常用的核酸清除劑多為化學試劑，例如84消毒液等含氯消毒劑，其雖然對核酸祛除的效果明 顯，但味道刺鼻，對實驗人員不友好，而且對金屬有腐蝕性，不能處理PCR儀器、移液器、核酸提取儀、離心機等精密儀器，會影響儀器壽命及精密度。下圖1、2為某實驗室長期使用帶腐蝕性的消毒劑，導致設備出現銹蝕和故障的。

圖1：生物安全柜長期使用含氯消毒劑進行消毒，導致內部生銹

圖2：實驗員錯誤的使用含氯消毒劑對PCR儀內部孔位進行消毒，導致PCR儀損壞

    國測生物經過研發，推出新一代酶解型核酸清除劑：表清。

    表清采用全能核酸酶，快速與單鏈、雙鏈、線狀、環狀、天然或變性等各種形式的DNA或RNA進行反應，將其降解為3至5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸。

  1、無毒無害、無色無味：

    表清是一款酶解型無毒害、無腐蝕、無刺激的核酸清除劑，適用于玻璃、塑料、陶瓷、橡膠、鋼材和金屬等多種材質，成分對人員友好。

  2、作用迅速、耐受性強：

    表清主要成分為全能核酸酶，在工作狀態下，5min即可有效降解2μg的質粒DNA

  3、半衰期短、不易殘留：

    表清混勻后使用，在室溫下將會自然失活，不易殘留。

  4、操作簡單、輕松使用：

    表清混勻后直接噴灑在固相表面，或打濕一次性抹布/紗布后再擦拭精密儀器的固相表面，過5-10分鐘后，可用干凈抹布或紙巾擦拭。

6.1 熒光定量方法驗證：

    將陽性質粒，分別與純水、表清按200μL：200μL的模式混合，反應10min后，各組取200μL提取核酸，與陽性質粒一起進行檢測，結果如下圖3所示：原始的陽性質粒Ct值為22.39，純水反應組的Ct值為22.78，表清反應組沒有Ct值，說明10min內，表清已經完全將陽性質粒降解掉。

圖3：表清降解陽性質粒效果圖

6.2 瓊脂糖凝膠方法驗證

    取5μLPCR擴增產物，分別與5μL核酸清除劑、5μL純水混合，反應10min，立即進行凝膠電泳，結果如圖4所示，反應組1已經看不到明顯的擴增片段，而對照組2能看到明顯的600bp大小條帶。

圖4：表清降解PCR擴增產物效果圖

圖5：對實驗室環境進行噴霧處理

圖6：一次性紗布蘸取適量表清對離心機表面進行擦拭處理

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